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Sf9(昆虫卵巢细胞)

产品详请

Sf9 (昆虫卵巢细胞)

一、细胞基本属性
细胞名称	Sf9 (昆虫卵巢细胞)
细胞别称	SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9
商品货号	ORC0171
种属来源	昆虫
年龄性别	蛹
组织来源	卵巢
生长特性	半贴半悬
细胞形态	圆形
背景简介	Sf9细胞是源于雌性草地贪夜蛾蛹的卵巢组织,可以用于复制杆状病毒表达载体。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况
保藏机构	ATCC; CRL-1711 DSMZ; ACC-125 ECACC; 89070101
培养基	TNM-FH+10% FBS+1% P/S
培养条件	气相:空气,100%;温度:28℃
冻存条件	冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮
倍增时间	~27-50 hours
STR鉴定位点

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主

37度水浴摇晃尽快融化细胞,直接在冻存管内将细胞离心。离心转速以离心力150g(约900rpm)左右,1min为宜,弃上清,沉淀用新鲜培养基重悬后接种到10cm培养皿,显微镜下观察细胞并拍照,24h后换液一次

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。

9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。