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大鼠鼓膜表皮干细胞

产品详请

大鼠鼓膜表皮干细胞

一、细胞基本属性
细胞名称	大鼠鼓膜表皮干细胞
组织来源	鼓膜
商品货号	ORCR387
种属来源	大鼠
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	鼓膜也称耳膜,为一弹性灰白色半透明薄膜,将外耳道与中耳隔开。鼓膜穿孔不能愈合,可能与干细胞受损或增殖抑制有关。鼓膜上皮干细胞的分布与鼓膜的血供丰富的区域一致。鼓膜上皮干细胞高表达β1整合素,有很强的黏附型,对Ⅳ型胶原的黏附鼻其他细胞更快、更强。
包被条件	PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基	大鼠鼓膜上皮干细胞专用培养基
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
细胞形态	铺路石状细胞,不规则
传代特性	可传1-2代
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相:空气,95%;CO2,5%

方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠鼓膜表皮干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合澳睿赛密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠鼓膜表皮干细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

大鼠鼓膜表皮干细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

二、使用方法

大鼠鼓膜表皮干细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

4. 细胞实验