人皮肤肥大细胞-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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人皮肤肥大细胞

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：5×10?cells/T25细胞培养瓶

货号：ORCH318

价格： ￥6480/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-05-09

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产品详请

产地	上海
保存条件	详见说明
品牌	澳睿赛生物
货号	ORCH318
用途	仅供科研实验使用
组织来源	皮肤组织
细胞形态	详见说明
是否是肿瘤细胞	否
保质期	详见说明
器官来源
免疫类型
品系
生长状态	详见说明
物种来源	人
包装规格	5×10?cells/T25细胞培养瓶
是否进口	否

人皮肤肥大细胞

一、细胞基本属性
细胞名称	人皮肤肥大细胞
组织来源	皮肤组织
商品货号	ORCH318
种属来源	人
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	人皮肤肥大细胞分离自皮肤组织;皮肤肥大细胞广泛分布于皮肤微血管周围,分泌多种细胞因子,参与免疫调节(T细胞、B细胞、APC细胞活化)。皮肤肥大细胞表达MHC分子、B7分子,具有APC功能。表达大量的IgE-Fc受体,释放过敏介质。具有弱吞噬功能,和血液的嗜碱粒细胞同样,具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这类颗粒,含有肝素、组织胺、5-羟色胺,由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质,可在组织内引起速发型过敏反应(炎症)。由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触,使细胞多陷于崩坏。肥大细胞呈圆形或卵圆形,细胞核小,呈圆形或椭圆形,染色浅,位于细胞中央。细胞常成堆或单个分布于血管附近。细胞呈圆形或卵圆形,细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒,均匀分布在核周围。
培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
包被条件
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
细胞形态	圆形、梭形、多角形
传代特性	可传1-2代
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相:空气,95%;CO2,5%

方法简介:澳睿赛实验室分离的人皮肤肥大细胞采用胶原酶 - 胰蛋白酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:澳睿赛实验室分离的人皮肤肥大细胞经CD117免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

人皮肤肥大细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

人皮肤肥大细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈圆形、梭形、多角形,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技

术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。

1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

2)本产品未通过用于活体诊断的审核

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考