MIA PaCa-2 人胰腺导管癌细胞-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

您当前的位置：网站首页 > 产品展厅 >细胞系 >人源细胞系 >MIA PaCa-2 人胰腺导管癌细胞

MIA PaCa-2 人胰腺导管癌细胞

产品详请

MIA-PACA-2人胰腺导管癌细胞(STR鉴定正确)

一、细胞基本属性
细胞名称	MIA-PACA-2人胰腺导管癌细胞
细胞别称	MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2; MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2;人胰腺癌细胞
商品货号	ORC0785
种属来源	人
年龄性别	男;65岁
组织来源	胰腺
生长特性	半贴壁半悬浮生长
细胞形态	上皮样贴壁细胞,伴有圆形漂浮细胞
背景简介	MIA PaCa-2细胞系由A. Yunis等人于1975年从一名65岁的高加索男性获得的胰腺肿瘤组织中建立。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况	human colony stimulating factor, subclass I (CSF-I); plasminogen activator
保藏机构	ATCC; CRL-1420 DSMZ; ACC-733 ECACC; 85062806 JCRB; JCRB00
培养基	90% DMEM+10% FBS+2.5%马血清+双抗
培养条件	气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件	无血清冻存液,液氮储存
倍增时间	26 hours (PubMed=25984343); 25.7 +- 4.3 hours (PubMed=27067801); 40 hours, 18 hours, in serum-free medium (PubMed=23386380); ~40 hours (ATCC); ~30-40 hours (DSMZ)
STR鉴定位点	Amelogenin:X;CSF1PO:10;D2S1338:25;D3S1358:16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;D13S317:12,13;D16S539:10,13;D18S51:12;D19S433:15;D21S11:29,31.2;FGA:22;PentaD:12,16;PentaE:13,18;TH01:9,10;TPOX:9;vWA:15;D6S1043:12;D12S391:19;D2S441:14;

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、收集细胞培养上清:抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清,细胞重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。

b、剩下贴壁的细胞,用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。

c、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加少量培养基终止消化。

d、按3mL/瓶补加培养基,轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

e、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养中。(第一次传代建议一个满的T25传一个10cm或者2个T25)。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。

9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。