小鼠视网膜色素上皮细胞-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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小鼠视网膜色素上皮细胞

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：5×10?cells/T25细胞培养瓶

货号：ORCM301

价格： ￥3280/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-05-09

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产品详请

产地	上海
保存条件	详见说明
品牌	澳睿赛生物
货号	ORCM301
用途	仅供科研实验使用
组织来源	眼组织
细胞形态	详见说明
是否是肿瘤细胞	否
保质期	详见说明
器官来源
免疫类型
品系
生长状态	详见说明
物种来源	小鼠
包装规格	5×10?cells/T25细胞培养瓶
是否进口	否

小鼠视网膜色素上皮细胞

一、细胞基本属性
细胞名称	小鼠视网膜色素上皮细胞
组织来源	眼组织
商品货号	ORCM301
种属来源	小鼠
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	小鼠视网膜色素上皮细胞分离自眼组织;视网膜色素上皮为一层矮六角棱柱状细胞,高8~10μm,宽12~18μm。细胞顶部伸出许多长5~7μm的突起。在胚胎发生时,上皮基部和脉络膜紧密连接,但顶部与视细胞连接不紧,故易在此发生视网膜剥离。电镜观察,细胞之间有紧密连接、中间连接和缝隙连接,基底部有胞膜内褶和线粒体,故推测色素上皮有运输离子和屏障作用。胞核圆形,位于细胞基部。顶部胞质含许多椭圆或圆形的黑色素颗粒和含板层碎片的残余体。滑面内质网发达,分布于色素颗粒和残余体之间。有高尔基复合体、溶酶体、粗面内质网和脂滴。这些结构反映了色素上皮的多种功能:①色素颗粒由粗面内质网产生,经高尔基复合体转运至胞质顶部。已知两栖类和鱼类受强光照射时,色素颗粒移入突起中;处于黑暗时,色素颗粒又回到胞质中,这说明色素上皮有吸收光和保护视细胞免受强光刺激的作用;②脂滴有集聚和贮存维生素A的作用,通过滑面内质网的酯化与转运,参与视细胞合成视紫红质;③能吞噬脱落的视杆细胞外节膜盘,藉溶酶体酶水解消化,形成残余体;④分泌蛋白多糖,粘合和维持视杆、视锥与色素上皮的相互位置关系,从而保证视紫红质的更新和营养物质的传递。
培养基	ECM基础培养基,FBS,Penicillin,Streptomycin等;
包被条件	鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
细胞形态	上皮细胞样
传代特性	不建议传代
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相:空气,95%;CO2,5%

方法简介:澳睿赛实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞采用酶液消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:澳睿赛实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞经CK-8免疫荧光鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

小鼠视网膜色素上皮细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

小鼠视网膜色素上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样 ,在澳睿赛技术部标准操作流程下,不建议传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技

术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。

1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

2)本产品未通过用于活体诊断的审核

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考