T84(人结肠腺癌肺转移细胞)-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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T84(人结肠腺癌肺转移细胞)

英文名称：T84

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：1×10?cells/T25培养瓶

货号：ORC0191

价格： ￥1800/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-05-09

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产地	上海
品牌	澳睿赛生物
货号	ORC0191
用途	仅供科研实验使用
英文名称	T84
包装规格	1×10?cells/T25培养瓶
纯度	%
CAS编号
保质期	详见说明
是否进口	否

T84人结肠腺癌肺转移细胞(STR鉴定正确)

一、细胞基本属性
细胞名称	T84人结肠腺癌肺转移细胞
细胞别称	T 84、T-84
商品货号	ORC0191
种属来源	人
年龄性别	男
组织来源	器官:结肠; 疾病:结直肠癌;取材转移灶:肺
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
背景简介	T84细胞是从一位72岁男性结肠癌患者的肺转移灶建立的可移植人类癌细胞株;肿瘤组织皮下接种于BALB/c裸鼠,并连续进行移植。在裸鼠身上的移植过程中,细胞株始终保持结肠癌的原始组织性状。在无胸腺小鼠中传代23代后建立了T84细胞。T84细胞单层生长到饱和并在接触细胞间展现出紧密连接和桥粒,有很多关于多肽类激素和神经递质并维持定向电解质传输的受体。T84细胞展现了接触细胞中的紧密连接和桥粒,角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
生物安全等级	1
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况	carcinoembryonic antigen (CEA), 600ng/mL per 1×10^6 cells per 10 days; keratin
保藏机构	ATCC; CCL-248 ECACC; 88021101
培养基	DMEM/F12+5% FBS+1% P/S
培养条件	气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件	无血清冻存液,液氮储存
倍增时间
STR鉴定位点	Amelogenin:X;CSF1PO:10;D2S1338:23,26;D3S1358:16,19;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:15;D13S317:9;D16S539:10,11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:31;FGA:24;PentaD:9;PentaE:14;TH01:6,9;TPOX:8,11;vWA:17,18;D6S1043:19,20;D12S391:19,21;D2S441:10,14;

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜) 。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

b、加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。

9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。