RKO-E6(人结肠癌转基因细胞)-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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RKO-E6(人结肠癌转基因细胞)

英文名称：RKO-E6

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：1×10?cells/T25培养瓶

货号：ORC0272

价格： ￥1800/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-05-09

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产地	上海
品牌	澳睿赛生物
货号	ORC0272
用途	仅供科研实验使用
英文名称	RKO-E6
包装规格	1×10?cells/T25培养瓶
纯度	%
CAS编号
保质期	详见说明
是否进口	否

RKO-E6人结肠癌转基因细胞(STR鉴定正确)

一、细胞基本属性
细胞名称	RKO-E6人结肠癌转基因细胞
细胞别称	RKOE6
商品货号	ORC0272
种属来源	人
年龄性别
组织来源	结肠癌,转染插入到pCMV中的HPVE6
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
背景简介	RKO-E6细胞是用脂质体法转染pCMV-E6的结肠癌RKO细胞系。RKO-E6细胞含有稳定整合受控於巨细胞病毒启动子的人乳头状病毒(HPV)E6癌基因,RKO-E6细胞和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的细胞参数改变p53介导的转录和凋亡等。
生物安全等级	2 [Contains HPV6 and CMV viral sequences]
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
基因表达情况
保藏机构	ATCC; CRL-2578
培养基	MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
培养条件	气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件	无血清冻存液,液氮储存
倍增时间
STR鉴定位点	Amelogenin:X;CSF1PO:8,11;D2S1338:16;D3S1358:16,19;D5S818:12,13;D7S820:8,10;D8S1179:9,13,14;D13S317:8,12;D16S539:13,13.1;D18S51:11,13;D19S433:14;D21S11:28,30;FGA:19,22;PentaD:10,11;PentaE:11,13;TH01:6,10;TPOX:10,11;vWA:16,24.3;D6S1043:14.1,19;D12S391:15,20;D2S441:11;

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

b、加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

三、培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代。

9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。