人外周血单个核细胞-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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人外周血单个核细胞

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：5×10?cells/T25细胞培养瓶

货号：ORCH158

价格： ￥6344/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-10-31

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产品详请

产地	上海
保存条件	详见说明
品牌	澳睿赛生物
货号	ORCH158
用途	仅供科研实验使用
组织来源	外周血
细胞形态	详见说明
是否是肿瘤细胞	否
保质期	详见说明
器官来源
免疫类型
品系
生长状态	详见说明
物种来源	人
包装规格	5×10?cells/T25细胞培养瓶
是否进口	否

人外周血单个核细胞

Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC

一、细胞基本属性
细胞名称	人外周血单个核细胞
组织来源	外周血
商品货号	ORCH158
种属来源	人
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	人外周血单个核细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。
培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	半贴半悬浮
细胞形态	圆形
传代特性	不增殖;不传代
传代比例	不传代
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相:空气,95%;CO2,5%

方法简介:澳睿赛实验室分离的人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测:澳睿赛实验室分离的人外周血单个核细胞经经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

人外周血单个核细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

人外周血单个核细胞是一种半贴半悬浮细胞,细胞形态呈圆形,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞不增殖;不传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 半贴壁半悬浮细胞处理

1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用吸管吸取PBS,吹洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;经1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀①;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,收集细胞悬液至离心管中;经1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀②;

4)吸取5ml新鲜完全培养基,重悬细胞沉淀①、细胞沉淀②,把①、②混匀。

5)用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,按实验需求接种于实验器皿内,然后补充适量新鲜的完全培养基,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

6)待细胞状态稳定后,用于实验;可以每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。

1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

2)本产品未通过用于活体诊断的审核

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考