小鼠支气管平滑肌细胞-澳睿赛生物技术（上海）有限公司

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小鼠支气管平滑肌细胞

品牌：澳睿赛生物

产地：上海

型号：5×10?cells/T25细胞培养瓶

货号：ORCM158

价格： ￥4654/瓶
发布日期： 2024-08-22
更新日期： 2025-03-21

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产品详请

产地	上海
保存条件	详见说明
品牌	澳睿赛生物
货号	ORCM158
用途	仅供科研实验使用
组织来源	支气管组织
细胞形态	详见说明
是否是肿瘤细胞	否
保质期	详见说明
器官来源
免疫类型
品系
生长状态	详见说明
物种来源	小鼠
包装规格	5×10?cells/T25细胞培养瓶
是否进口	否

小鼠支气管平滑肌细胞

一、细胞基本属性
细胞名称	小鼠支气管平滑肌细胞
组织来源	支气管组织
商品货号	ORCM158
种属来源	小鼠
产品规格	5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
细胞简介	小鼠支气管平滑肌细胞分离自支气管组织;支气管(Bronchi),是指由支气管分出的各级分枝,由支气管分出的一级支气管,即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较,前者较细长,走向倾斜;后者较粗短,走向较前者略直,所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是,支气管是以“C”型的支气管软骨为支架,而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能:①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力,保持支气管形态;②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础;③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质,发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率	每2-3天换液一次
生长特性	贴壁
细胞形态	成纤维细胞样
传代特性	可传3代左右
消化液	0.25%胰蛋白酶
培养条件	气相:空气,95%;CO2,5%

方法简介:澳睿赛实验室分离的小鼠支气管平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:澳睿赛实验室分离的小鼠支气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

小鼠支气管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

小鼠支气管平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传3代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;

3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;

4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技

术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。

1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

2)本产品未通过用于活体诊断的审核

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考